aids-第14章

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此用PCR可判定婴儿是否真正被HIV感染。　　
（一）血清抗体阳性病人HIV序列的检测　　
有人从AIDS或ARC病人的外周血单核细胞培养物，精液细胞和精液上清制备DNA。然后用PCR法和逆转录酶测定法分别检测HIV…1。PCR扩增产物与32P标记的探针退火之后用BstNI消化。再进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和自显影。结果表明，在逆转录酶阴性的28个细胞系中有9个以及用逆转录酶法不能确定的9个细胞系中有2个为阳性。这说明过去许多细胞培养物认为是阴性者，实际上用更敏感的PCR测定时则为阳性。　　
从血清阳性的HIV感染者的外周血单核细胞中可检测出前病毒序列。通过共培养分离出病毒的血清阳性的同性恋男人血液制备的DNA，用PCR可100％检出病毒序列；用血清阴性共培养阴性同性恋者的标本，经PCR扩增检出病毒序列者为64％，血清阴性正常人标本PCR检测也为阴性，表明未出现假阳性结果。由于HIV…1基因组的广泛的异源性，为提高检测的阳性率可采用多种引物（如LTR，gag和env基因的引物）。利用PCR法从313份已证实为抗体阳性的标本中检测出310份HIV阳性（99％）。　　
　（二）血清抗体阴性病人的HIV序列的检测　　
由于在感染HIV后到出现免疫反应之前有一段滞后期；这个血清学阴性的滞后期通常长达6周至6个月；而且无抗体产生期可能更长些。在此期间受感染者往往检测不到抗体；因此；血清阴性的人也可能已感染HIV。PCR法在高危人群中检测到HIV…1比由血清学转阳确诊的时间可以提高6个月。对少数初次共培养呈阴性的人；甚至可在血清转阳之前24～39个月就能确诊为HIV…1感染。对血清学试验结果不能确定者；也可通过PCR作进一步分析和确诊。　　
（三）新生儿HIV序列的检测　　
HIV感染的母亲其婴儿由于母体抗体的存在；用抗体检测法通常为阳性。但实际上只有20％～60％的婴儿受到HIV感染。因此；对这些婴儿进行HIV感染的早期诊断是十分重要的。现已证明30～50％的这些新生儿可在母亲的子宫里；在分娩和引产或通过产后哺乳时从其母体感染HIV。新生儿血清阳性者并不能说明是HIV感染。因为母体HIV抗体可持续大约15个月之久。在一般情况下；婴儿并不表现出HIV感染的任何症状。病毒细胞培养法对婴儿并不是一种可靠实用的方法；HIV特异IgM抗体的检测在母体抗体存在下也是不可能的；在过量血清抗体存在下检出血清中的HIV抗原也是十分困难的。另外；婴幼儿被HIV感染后病情发展较快。早期诊断；对及时采取治疗措施；延缓阻止病情发展极为重要。目前所使用的抗病毒药毒性大；因而不能用于HIV抗体阳性而未感染的婴幼儿。但当用PCR检测出HIV…DNA序列后；即可进行抗病毒治疗以及加强免疫机能和营养的治疗。在一项研究中；14名血清阳性母亲的新生儿用PCR检测其中6个为阳性；在出生后12～15个月内血清阴性的10个儿童中有5个为PCR阳性。从血清阳性母亲出生1个月的新生儿中；收集的外周血单核细胞经PCR检测；7个为阳性的婴儿；其中5个在检测后10个月得AIDS；而PCR阴性的9个婴儿；在16个月的追踪检查期间身体状况良好。这些研究表明；PCR技术对被HIV感染母亲的新生儿和血清阴性儿童进行早期的直接的HIV…1检测是十分重要的。　　
PCR技术检测HIV…DNA序列对AIDS和ARC的确诊起着重要作用。但也有人认为
　　　　　　　　　　　　对已知HIV抗体、抗原或培养阳性的病人不必再做PCR。最合适的PCR检测对象是那些疑有HIV感染但又缺乏确切的血清学依据的人群，如上述的HIV阳性母亲所生的婴儿，阳性患者的性伴侣，静脉吸毒者和可疑的血清反应者。PCR技术还可用来检测血液制品及疫苗中有无HIV。　　
二、　　艾滋病诊断标准：　　
1．艾滋病病毒抗体阳性，又具有下述任何一项者，可为实验确诊艾滋病病人。　　
（1）近期内（3…6个月）体重减轻10％以上，且持续发热达38℃一个月以上；　　
（2）近期内（3…6个月）体重减轻10％以上，且持续腹泻（每日达3…5次）一个月以上。　　
（3）卡氏肺囊虫肺炎（PCR）　　
（4）卡波济肉瘤KS。　　
（5）明显的霉菌或其他条件致病感染。　　
2．若抗体阳性者体重减轻、发热、腹泻症状接近上述第1项时，可为实验确诊艾滋病病人。　　
（1）CD4/CD8（辅助/抑制）淋巴细胞计数比值