PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。因此，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。要设计引物首先要找到DNA序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区域单链能形成二级结构，就要避开它。如这一段不能形成二级结构，那就可以在这一区域设计引物。现在可以在这一保守区域里设计一对引物。一般引物长度为15~30碱基，扩增片段长度为100~600碱基对。让我们先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般为40%~60%。而且四种碱基的分布最好随机。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否则P1引物设计的就不合理。应重新寻找区域设计引物。同时引物之间也不能有互补性，一般一对引物间不应多于4个连续碱基的互补。引物确定以后，可以对引物进行必要的修饰，例如可以在引物的5′端加酶切位点序列；标记生物素、荧光素、地高辛等，这对扩增的特异性影响不大。但3′端绝对不...　

作者：王拥军前言　　前言　　酒，蕴含着人类数千年的文明。中国酒的发展已有数千年的悠久历史，酒文化是我国的政治、经济、历史文化等发展的缩影。几千年来，时时折射出灿烂辉煌的华夏古老文化之光。从古至今，美酒与英雄相得益彰，酒给了英雄豪杰不凡的壮举，多少侠忠义举之后英雄便借酒来抒发豪情壮志。千百年来多少文人墨客饮酒吟诵，借酒明志，留下佳作无数，赐予文化浓厚的生活气息。也是因为酒，才会有那么多美妙神奇的故事流传至今，一直为人们所津津乐道。　　有酒的地方就有酒文化，地域风光、人文景观、民俗风情、劳动追求皆为酒文化提供了丰富的源泉。从远古以来，酒便是祭祀天地、祖先的必备用品之一；在我国各民族中，无论是种种仪式习俗或是宴请宾客，酒在其中都不可或缺的。酒已逐渐成为了本民族的一种特殊文化的象征。而且，酒可以在书画里飘香，可以在音乐中流淌，可以在诗文中渲泻，也可以在舞蹈中飞扬。...　

++++++++++++++++++++++++++++++++幽默大全之外国卷文学家伊　索 欧里庇得斯 萨维奇 约翰逊 切斯特顿 吉卜林 史蒂文森斯威夫特 斯克尔顿 柯南道尔 毛　姆 狄更斯 萨克雷 德纳姆沃　勒 英　瑞 克里斯蒂 萧伯纳 王尔德 谢里登 拉伯雷科　佩 拉封丹 凡尔纳 巴尔扎克 斯塔尔夫人 雨　果 科克特大仲马 小仲马 库特林 贝尔纳 费　多 埃　梅 歌　德冯达诺 拉斯维茨 海　涅 霍夫曼 克雷洛夫 赫尔岑 托尔斯泰谢甫琴科 普希金 契诃夫 盖达尔 马雅可夫斯基 但　丁 斯特林堡安徒生 莫尔纳尔 奥尼尔 马克·吐温 海明威 艾略特 杰克·伦敦欧文·肖 兰德斯 卡尔顿 考夫曼 欧尼尔 康奈利 斯克尔顿趣答问路人 古希腊寓言作家伊索（约公元前6世纪在世），一天遇见一个行人向他问路。行人：“我到城里需走多长时间？”伊索：“你走哇。”行人：“我是得走，我是问走到城里需多长时间。”...　

作者：奥格·曼狄诺前言下面是节选。在古老的东方，挑选小公牛列竞技场格斗有一定的程序、它们被带进场地，向手持长矛的斗牛士攻击，裁判以它受激后再向斗牛士进攻的次数多寡来评定这只公牛的勇敢程度。从今往后．我须承认，我的生命每天都在接受类似的考验.如果我坚韧不拔，勇往直前，迎接挑战．那么我一定会成功。我不是为了失败才来到这个世界上的，我的血管里也没有失败的血液在流动。我不是任人鞭打的羔羊，我是猛狮，不与羊群为伍。我不想听失意者的哭泣，抱怨者的牢骚，这是羊群中的瘟疫，我不能被它传染。失败者的屠宰场不是我命运的归宿。坚持不懈，直到成功。生命的奖赏远在旅途终点，而非起点附近。我不知道要走多少步才能达到目标．踏上第一千步的时候，仍然可能遭到失败。但成功就藏在拐角后面，除非拐了弯，我永远不知道还有多远。再前进一步，如果没有用，就再向前一步。事实上，每次进步一点点并不太难。坚持不懈，...　

101集后全国大赛篇之苦战山王（1）　　湘北战胜了丰玉，要向全国高中篮球界的天王——山王工业进行决定性的　　挑战。 山王队员们离开了湘北和丰玉的比赛赛场，安西教练遇到了北野教练。　　与此同时，其它队伍的比赛结果野出来了，爱和学院103：58战胜横玉工业，　　大荣学院81：48战胜富房，常诚高中79：34战胜原口商业，崛商74：40战胜町　　田三，浦安商业93：58战胜汤来工业，赛前媒体认为的各个强队都进入了第二　　场比赛，59所学校中，有27所打道回府了。　　湘北的住处，三井大叫：“看清楚了吧，看你们还敢不敢把我们列入C级。”　　宫城说湘北打败了A级的丰玉，应该是AA级，墙上贴着相田彦一发来的传真“祝　　大胜利”。　　樱木说，湘北和山王势均力敌，赤木叫大家不要得意忘形，这只是第一战，　　樱木说赤木自己都乐坏了还装假正经。　　这时，赤木接到电话，是深则体大的唐泽教练，他恭喜湘北旗开得胜，告诉...　

　　月光如水铺地，清淡而又宁静，埃拉从落地的窗口向外望去，可以看见海岸线的那一边有一道道白线似的浪花从容地卷上海滩，又默默地退去。　　背后茶几上的电话铃声刺耳地响了起来，象一把锋利的刀狠狠地划破夜的安静，把埃拉从沉思中惊醒过来，他有些慌乱地从窗边退回来，从长沙发的背上直接撑跳过去，很快就把耳筒提到手中，但耳机中突然传过来的喧哗声又让埃拉立刻下意识的把话机与耳朵拉开了点距离。　　“嗨！兄弟，你该不会是要放我们鸽子吧？”班尼放肆的笑声从震耳欲聋的电子音乐背景中传来，听上去有种陌生感，“还是你害怕了？”　　“害怕什么？”埃拉冷笑一声，他放松地向后躺下去，沙发很宽大也很松软，立刻把他陷在其中。　　“他们安排我们十二点出场，准备好了么？”班尼问。　　几上的电话机边有一盒已经折开的烟，埃拉抽了一根出来，随意地点着，吸一口，再吐出一口烟来，“需要准备？”他不那么以为然。...　

　　糖，生于1975年，湖北孝感人，现就职为当地一家医院。　　性格：老实（踩不死一只蚂蚁，捏不死一只蚊子，如果进监狱，一准睡马桶边，还得给老大当球踢）善良（一天没被人骗，胃口不好身体不棒吃嘛嘛不香）幽默（据说是一个高人教的，说话做事傻一点，没人不笑破肚皮的）　　代表作品：八戒传、不可言说、坐床女、再版春宫图、男女关系绝对偷拍　　1、　　她说：感觉有一只眼睛老盯着她。　　老实说，我的女朋友还算过得去，皮肤白，个子高，长得象电影明星。不过，在三月的下午，突然一个电话吵醒了正在熟睡的我，我开始有点厌烦这个女人来。"甜心呀！你不知道我昨天是夜班吗？"　　她说：一双色迷迷的眼睛盯着她，不管是吃饭睡觉，还是上厕所。我说："甜心呀！除了我有这个胆，还有谁敢这样，他也不怕找打。"然后挨着亲爱的枕头拉上亲爱的被子，和她道别。她说：不理你了。上帝造女人，是为了告诉男人世界上还有数不清的麻烦数...　

上一页 目录页 下一页　　南方周末　　　2004-10-28 14:58:10　　□吴小龙　　为何当年作为战败国的中国能够有平心敛气、卧薪尝胆的精神，作为战胜国的中国能有既往不咎的宽大胸怀？为何在战争硝烟还未散尽之际，在国土饱受蹂躏、百孔千疮的时候，我们对战败者表现出了悲悯和宽厚？　　关于“Sina”是否就是“支那”，“新浪”是否应该改名，最近在网上有不少争论。有的学者做了考证与说明，指出了“支那”这个字眼最早恰恰是中国人自己的创造，是中国古代的高僧在翻译梵文佛经时，按照音译把cina翻译成“支那”，(至今许多汉文佛经中还是用“支那”这个词称呼中国的)而后这个词又随佛经传入日本。实际上，在清末民初的相当一段时间里，中国人对于“支那”中国字眼是一直在大大方方地使用着的。如梁启超以“支那少年”自称，翻开他的《饮冰室合集》和清末许多维新派、革命派的言论，很容易看到许多关于“支那”未来的豪言壮语和美好...　

黑树莓属蔷薇科树莓属的一个种。树莓为落叶小灌木，因其果型色与草莓相似，又长在树上，故树莓，是国内外近年兴起的第三代水果之一。树莓果酸甜可口，营养丰富，具有特殊浓郁的芳香，除鲜食外，还可加工果汁、饮料、果酒等。树莓适应性广，长势强，对土质无特殊要求，栽植当年即可少量挂果，第三、四年进入丰产期，亩产1200余kg。因其果品新颖奇特，在众多水果中独具一格，所以也极具市场竞争力和发展前景。树莓分蘖力强，栽植第2年后，每株每年可分蘖新苗10余株，是生态效益、经济效益极高的小灌木果树品种。适合家庭庭院和盆载种植。黑树莓原产美国，属浆果类果树，是多年生落叶小灌木，树高1.5－2米，果实长于树上，果实椭圆形，成串成簇，晶莹乌亮，香甜多汁，口感清香爽口，非常好吃，维生素C的含量是苹果的5倍、葡萄的6倍，特别是所含鞣化酸被美国科学家证实是预防癌症最有效的物质。由于营养成分和出汁率优于众多水果，被联...　

主讲人简介金开诚，北京大学中文系教授、博士生导师；全国政协常委；九三学社全国中央副主席。金开诚一生潜心于文学艺术的研究，曾著有《文艺心理学》、《文化古金谈》、《艺术欣赏之旅》、《中国书法文化大观》等论著。中央电视台科教频道《百家讲坛》栏目6月17日将特邀金开诚为您讲述《书法艺术之美的理解与欣赏》，敬请关注。内容简介中国书法艺术是汉字的艺术造型。中国书法艺术是土生土长、地地道道的民族传统艺术。有人说它是和绘画相通的，因为“书画同源”；有人说它和建筑相通，因为都要强调平衡和稳定；也有人说它和舞蹈相通，因为一个个字就像舞蹈家的舞姿那么优美；还有人说它具有诗美，因为它像诗歌一样很能够启发人的联想和想像；也有人说它具有音乐美，因为它和音乐一样，具有内在的节奏和韵律。更加有意思的一种说法，说书法它具有人体结构和人体的仪态之美。那么，如果用一句话来概括就可以这么说：中国书法艺术就...　

　　（二十三）妙玉结局大揭秘－刘心武　　 主讲人简介：　　　刘心武，当代著名作家。　　1942年出生于四川省成都市，1950年后定居北京。曾当过中学教师、出版社编辑、《人民文学》杂志主编。　　1985年发表纪实作品《5·19长镜头》《公共汽车咏叹调》，再次引起轰动。　　1986-1987在《收获》杂志开辟《私人照相簿》专栏，开创图文相融的新文本，1999年推出图文融合的长篇《树与林同在》。　　1992年后发表大量随笔，结为多种集子。　　1995年后开始尝试建筑评论，1998年由中国建筑工业出版社出版《我眼中的建筑与环境》，2004年由中国建材工业出版社出版《材质之美》。　　1993年出版《刘心武文集》8卷，至2005年初在海内外出版的个人专著以不同版本计已逾130种。若干作品在境外被译为法、日、英、德、俄、意、韩、瑞典、捷克、希伯来等文字发表、出版。...　

The Life of Thomas Telford by Smilesby Samuel Smiles"Let us travel, and wherever we find no facility fortravelling from a city to a town, from a village to ahamlet, we may pronounce the people to be barbarous"Abbe Raynal"The opening up of the internal communications of acountry is undoubtedly the first and most importantelement of its growth in commerce and civilization"Richard CobdenCONTENTSPrefaceEARLY ROADS AND MODES OF TRAVELLINGCHAPTER I. Old RoadsRoads as agents of civilizationTheir important usesAncient British trackways or ridgewaysThe Romans and their roads in BritainDecay of the Roman roadsEarly legislation relating to highways...　

Hunting the Grisly and Other Sketchesby Theodore RooseveltAn Account of the Big Game of the UnitedStates and its Chase with HorseHound, and RifleCHAPTER I.THE BISON OR AMERICAN BUFFALO.When we became a nation in 1776, the buffaloes, the first animals tovanish when the wilderness is settled, roved to the crests of themountains which mark the western boundaries of Pennsylvania, Virginia,and the Carolinas. They were plentiful in what are now the States ofOhio, Kentucky, and Tennessee. But by the beginning of the presentcentury they had been driven beyond the Mississippi; and for the nexteighty years they formed one of the most distinctive and...　

Miss Sarah Jack, of Spanish Town, Jamaicaby Anthony TrollopeThere is nothing so melancholy as a country in its decadence, unlessit be a people in their decadence. I am not aware that the lattermisfortune can be attributed to the Anglo-Saxon race in any part ofthe world; but there is reason to fear that it has fallen on anEnglish colony in the island of Jamaica.Jamaica was one of those spots on which fortune shone with the fullwarmth of all her noonday splendour. That sun has set;whether forever or no none but a prophet can tell; but as far as a plain man maysee, there are at present but few signs of a coming morrow, or ofanother summer.It is not just or proper that one should grieve over the misfortunesof Jamaica with a stronger grief because her savannahs are ...　

The Uncommercial Travellerby Charles DickensCHAPTER I - HIS GENERAL LINE OF BUSINESSAllow me to introduce myself - first negatively.No landlord is my friend and brother, no chambermaid loves me, nowaiter worships me, no boots admires and envies me. No round ofbeef or tongue or ham is expressly cooked for me, no pigeon-pie isespecially made for me, no hotel-advertisement is personallyaddressed to me, no hotel-room tapestried with great-coats andrailway wrappers is set apart for me, no house of publicentertainment in the United Kingdom greatly cares for my opinion ofits brandy or sherry. When I go upon my journeys, I am not usuallyrated at a low figure in the bill; when I come home from my...　

　　有人说，我的名字，覆灭了整整一个王朝。我冷笑，斟一杯花雕，一口饮尽。　　城头上长满荒草，那苍翠的颜色如一颗凄清的泪，悬挂在薄暮的腮边。有风泠泠，自灰色的城墙砖间穿梭而过。　　我坐在城头，脚下是亘古的沉寂与干涸的血色，西边的天际悬着将出的月，清浅地着落在尚显明亮的天空。那是一块容易伤感的地方，缓慢滞重，滋生出寂寞的触角。我抬起头，落日的余晖铺满城楼，仿佛我凌波一舞时披在身上的那层红绫。书上说：那一日，残阳如血。　　残阳如血。你的大槊在金晖下大开大阖，每一个起落，必定掀起一片血海。我不要你为我背负，而你，却定要负尽天下，为你的际遇，劈杀出一片绮罗香泽的起承转合，将我注定被你以一世宠爱的名字，以你的大槊，铸成一段无法剪去的耻辱，写满你仓惶的背影，与我枯槁的衣袖。　　这尘世，容得下绝色的女子，却容不下一个令英雄折腰，致他负罪千古江山的名字。　　而其实，我又能怎样？我...　

，，女人玩世界和女友一起去正大广场逍遥。我其实很喜欢fb一词，它让我有堕落的快感。但现在好像不许随便乱用了。正大广场是个奇妙的地方，集中了所有你你能想象的消费场所。一家家小店布置得精致，标签后面总是不经意地拖了几个零。六层以上已经吃喝盛行，几乎沪上流行的菜馆这里都有分支机构，我们要去的是七楼。这个很有意思，楼下刚吃完，楼上就开始消食了，不少减肥中心。女人的一生就是吃了减，减了吃。朋友带我沿七楼转一圈，真是叫我惊叹啊，威尔士的健身中心里花样百出，除了器械之外，瑜伽馆就两个，还分热冷。健身房有我喜欢的肚皮舞和拉丁，搞得我蠢蠢欲动，老想去买它家的十年卡，因为根据我有限的数学知识，好像只有十年卡最划算。旁边有美容院，除了美容还有减肥套餐，用个什么仪器在你身上扫一下，据说下来就轻两斤，不过价格也是够糁人的。我赶紧捂紧口袋，以免荷包迅速瘪下去，就这一会儿，被忽悠的差点三万块...　

The Garden PartyThe Garden PartyBy Katherine Mansfield1- Page 2-The Garden Party1. AT THE BAY.Chapter 1.I.Very early morning. The sun was not yet risen, and the whole ofCrescent Bay was hidden under a white sea-mist. The big bush-coveredhills at the back were smothered. You could not see where they endedand the paddocks and bungalows began. The sandy road was gone andthe paddocks and bungalows the other side of it; there were no white...